Méthode d'identification des capsules de gélatine bovine et porcine

L'utilisation de capsules de gélatine dans les industries pharmaceutiques et nutraceutiques est très répandue en raison de leur capacité à encapsuler une variété de composés. Cependant, la source de gélatine utilisée dans ces capsules peut varier, les bovins et les porcins étant les deux sources les plus courantes. Dans cet article de blog, en tant que fabricant personnalisé de capsules de gélatine bovine de haute qualité, Wecaps partagera avec vous la méthode d'identification des capsules de gélatine bovine et porcine.

Comprendre la composition de la gélatine

La gélatine est une protéine dérivée du collagène, qui est extrait des os, de la peau et des tissus conjonctifs des animaux. La principale différence entre la gélatine bovine et la gélatine porcine réside dans leurs animaux d'origine et les types spécifiques de collagène qu'elles contiennent. La gélatine bovine est principalement dérivée du collagène de type I présent dans les vaches, tandis que la gélatine porcine est dérivée du collagène de type I présent dans les porcs.

Méthodes d'identification

Techniques moléculaires

a. Réaction en chaîne par polymérase (PCR)

La PCR est une technique de biologie moléculaire puissante utilisée pour amplifier des séquences d'ADN spécifiques, permettant ainsi d'identifier le matériel génétique de la source de la gélatine. La méthode consiste à :

1. Préparation de l'échantillon : extraire l'ADN des capsules de gélatine à l'aide d'un kit d'extraction d'ADN. Cela implique de dissoudre la gélatine dans une solution tampon et de la traiter avec des enzymes pour libérer l'ADN.

2. Amplification par PCR : utiliser des amorces spécifiques à l'ADN bovin ou porcin. Par exemple, des amorces ciblant les séquences d'ADN mitochondrial bovin (ADNmt) ou les gènes mitochondriaux porcins spécifiques tels que le cytochrome b peuvent être utilisées. Le processus de PCR amplifie ces séquences spécifiques si elles sont présentes.

3. Électrophorèse sur gel : passez les produits PCR sur un gel d'agarose pour les séparer en fonction de leur taille. La présence de bandes spécifiques correspondant à l'ADN bovin ou porcin confirmera la source de la gélatine.

b. PCR en temps réel (qPCR)

La PCR en temps réel, ou PCR quantitative, est une technique avancée qui permet la quantification de l'ADN et offre une sensibilité supérieure à la PCR traditionnelle. Elle implique :

1. Préparation de l’échantillon : Similaire à la PCR, extrayez l’ADN des capsules de gélatine.

2. PCR en temps réel : utilisez des sondes ou des colorants fluorescents qui se lient à des séquences d'ADN spécifiques. L'intensité de la fluorescence est corrélée à la quantité d'ADN cible, ce qui permet de quantifier l'ADN bovin ou porcin.

3. Analyse des données : Analysez les données de fluorescence pour déterminer la présence et la quantité d’ADN bovin ou porcin, identifiant ainsi la source de gélatine.

Techniques basées sur les protéines

a. Spectrométrie de masse (MS)

La spectrométrie de masse peut être utilisée pour analyser la composition protéique de la gélatine. Le procédé comprend :

1. Préparation de l'échantillon : Dissolvez la gélatine dans un solvant approprié et digérez-la avec des enzymes protéolytiques pour la décomposer en peptides.

2. Analyse des peptides : utilisez la spectrométrie de masse pour analyser les fragments de peptides. Comparez les profils peptidiques avec les profils connus de gélatine bovine et porcine pour identifier la source.

b. Désorption/ionisation laser assistée par matrice (MALDI)

La spectrométrie de masse MALDI est un type spécifique de spectrométrie de masse utile pour identifier les protéines et les peptides. Le processus comprend :

1. Préparation de l'échantillon : préparez une matrice avec l'échantillon de gélatine et appliquez-la sur la plaque cible MALDI.

2. Spectrométrie de masse : Analyser l'échantillon pour obtenir un spectre de masse. Les pics du spectre correspondent aux masses des fragments peptidiques et peuvent être comparés aux spectres connus de la gélatine bovine et porcine.

c. Électrophorèse

L'électrophorèse sur gel de polyacrylamide-dodécyl sulfate de sodium (SDS-PAGE) est une technique utilisée pour séparer les protéines en fonction de leur taille :

1. Préparation de l'échantillon : Dissolvez les capsules de gélatine dans un tampon d'échantillon et appliquez-les sur un gel SDS-PAGE.

2. Électrophorèse : séparez les protéines par taille et comparez le motif de bandes du gel avec les motifs de référence de la gélatine bovine et porcine.

3. Identification des protéines : utilisez des techniques de Western blot ou de coloration pour identifier des protéines spécifiques caractéristiques de la gélatine bovine ou porcine.

Techniques spectroscopiques

a. Spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR)

La spectroscopie FTIR identifie les compositions moléculaires en fonction de l'absorption infrarouge :

1. Préparation de l'échantillon : Préparez l'échantillon de gélatine sous forme de film mince ou à l'aide d'une pastille de KBr.

2. Spectroscopie : Analysez l'échantillon à l'aide de la spectroscopie infrarouge à transformée de Fourier (FTIR). Différentes sources de gélatine présentent des modèles d'absorption infrarouge distincts correspondant à leurs vibrations moléculaires.

3. Interprétation des données : comparer les spectres FTIR avec les spectres de référence pour la gélatine bovine et porcine.

b. Spectroscopie par résonance magnétique nucléaire (RMN)

La spectroscopie RMN fournit des informations détaillées sur la structure moléculaire de la gélatine :

1. Préparation de l’échantillon : Dissoudre la gélatine dans un solvant approprié pour l’analyse RMN.

2. Spectroscopie : Effectuer une spectroscopie RMN pour obtenir des données de déplacement chimique. Analyser les spectres pour identifier les caractéristiques moléculaires spécifiques de la gélatine bovine ou porcine.

3. Comparaison : comparer les données RMN avec les spectres de référence pour la gélatine bovine et porcine connue.

Les capsules de gélatine Wecaps sont spécialement conçues comme forme posologique orale pour les formulations pharmaceutiques. Ces capsules sont fabriquées à partir de collagène bovin de haute qualité et produites selon un processus contrôlé avec précision. Elles présentent une excellente biocompatibilité, stabilité et sécurité, ce qui en fait le matériau optimal pour les vecteurs de médicaments. Bienvenue pour consulter notre service de personnalisation de capsules de gélatine !